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不同厂家对于elisa试剂盒的操作要求也不尽相同，有些需要放置-20℃，有些则需要4℃保存，即使是同样的试剂盒，每个人对说明书的解读也有万千差异

，以洗板后的拍板为例
，一千个人阅读说明书

，就有一千种拍板方式
。不少人甚至认为ELISA操作是个体力活
，拿出科比扣篮的架势
；还有小伙伴突发奇想，让孔板自然干燥，最终出现了读数高
、CV值高、背景高的「三高」结果。此时若有一则操作视频指导，便能一目了然。 一、说明书中洗板步骤 Manual：Discard the solution in the plate without touching the side walls.Clap the plate on absorbent filter papers or other absorbent material.Fill each well completely with 350ul wash buffer and soak for 1 to

对于经常进行抗体检测工作的人来说，非特异性结合和背景着色常常是一大困扰，某些情况下二抗存在交叉反应是主要原因。 二抗，即第二抗体，是能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。二抗的制备一般是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质
，去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白
。因此二抗实际上也是多抗，本身的特性决定了其大概率会存在交叉反应。 针对这一问题
，我们可以在制备二抗时添加一步预吸附的纯化步骤，以提高抗体的特异性
。基本原理是将二抗流经固定有潜在交叉反应的物种的血清蛋白的基

一、基本定义 酶联免疫吸附法（elisa）：指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上，进行免疫反应的定性和定量方法。 二
、elisa基本原理 1971年，Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（酶联免疫吸附测定，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：1.使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。2.使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体
，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性
，又保留酶的活性

。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不